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核酸提取(核酸提取方法介绍)
核酸是由许多核苷酸聚合而成的生物大分子化合物 , 是生命中最基本的物质之一 。 核酸存在于所有动物细胞、植物细胞、微生物和生物体中的核酸通常与蛋白质结合形成核蛋白 。 不同的核酸具有不同的化学组成和核苷酸序列 。 核酸主要包括RNA(核糖核酸)和DNA(脱氧核糖核酸) , 其中DNA是储存、恢复深圳生活网、传递遗传信息的主要物质基础 。

文章插图
核酸提取的原理首先保证了深圳生命网核酸一级结构的完整性 , 其次消除了其他分子的污染 。
提取核酸时 , 要注意简化步骤 , 缩短提取时间 。 减少化学因素对核酸的降解;减少物理因素对核酸的降解:机械剪切力和高温;防止核酸的生物降解 。
核酸提取大致分为三个部分:片段化、提取和纯化 。
细胞裂解法
1.物理方法:水煮法、玻璃珠法、超声波法、研磨法、冻融法、均质法 。
2.化学方法:表面活性剂(SDS法) , 碱裂解法 。
3.生物学方法:酶法(溶菌酶、蛋白酶K等) 。 ).
常见样品提取方法概述 。
浓盐法:通过RNA和DNA在盐溶液中的溶解度不同来分离 。
有机溶剂提取法:有机溶剂作为蛋白质变性剂 , 同时抑制核酸酶的降解 。
梯度离心:利用不同内容物密度不同的原理 , 分离各种内容物 。
材料结合法:①二氧化硅材料结合高盐低PH值的核酸 , 同时用低盐高PH值洗脱;②阴离子交换树脂结合低盐高PH值的核酸 , 同时用高盐低PH值洗脱;③包裹不同基因的磁珠和颗粒可以吸附不同的物体 , 从而达到分离的目的 。
胍盐萃取结合二氧化硅吸附法 。
二氧化硅具有特异性吸附核酸的特性 , 异硫氰酸胍可以裂解细胞 。 因此 , 在高浓度异硫氰酸胍的存在下 , 从包括细菌或病毒颗粒的细胞中释放的核酸成分可以结合到二氧化硅上 , 并且血液和尿液中的脱氧核糖核酸和核糖核酸可以通过这一特性提取 。
表达RNA快速提取试剂 。
显达基因快速RNA提取试剂 , 可在5分钟内快速提取纯化组织、血液、拭子、细胞等不同小微样本中的病毒5分钟RNA 。 从产物中提取的RNA可直接用于核酸扩增检测、体外逆转录、基因克隆、文库构建、杂交等各种生物学实验和研究 。
离心柱萃取
离心柱技术是一种比较简单的分离纯化微量核酸的方法 , 属于硅吸附法 , 原则上可分为三部分:
(1)用裂解液促进细胞破碎 , 释放细胞内核酸 。
②释放的核酸被特异性吸附在特定的硅载体上 , 硅载体对核酸只有很强的亲和力和吸附力 , 但基本不吸附蛋白质、多糖、脂质等其他生化成分 , 因此深圳生命网在离心时被抛出柱外 。
(3)用洗脱液洗脱吸附在特定载体上的核酸 , 分离得到纯化的核酸 。
磁珠法
根据与硅胶膜离心柱相同的原理 , 利用纳米技术对超顺磁性纳米粒子进行表面改性 , 制备了超顺磁性二氧化硅纳米磁珠 。 磁珠可以特异性识别并有效结合微观界面上的核酸分子 。 利用二氧化硅纳米球的超顺磁性 , 在离液盐(盐酸胍、异硫氰酸胍等)的作用下 , 可以从血液、动物组织、食品、病原微生物等样品中分离出DNA和RNA 。 )和外磁场 , 可应用于临床疾病诊断、输血安全、法医鉴定、环境微生物检测、食品安全检测、分子生物学研究等各个领域 。
【核酸提取仪96通道,核酸提取方法介绍】
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